ensemencement minimal

[invite2d571b60]

Bonjour,

Je travaille sur des cellules HEK293T. Je dois faire des expériences en microscopie automatisées et pour l'analyse, il vaut mieux que les cellules ne soit pas complétement confluentes.
Ma question est donc : quelle est la densité minimum à laquelle je peux ensemencer mes cellules sans affecter leur prolifération ? Sachant que mes cellules sont ensemencées 3-4 jours avant leur fixation...

Merci par avance
Interleukin
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[LXR]

Bonjour et bienvenue sur Futura Sciences,

Sans connaitre le support sur lequel tu souhaites ensemencer tes cellules (diamètre 100, plaque 6 puits,...), on ne peut pas te répondre précisément.

[invite2d571b60]

Bonjour,
Exact, j'ai pas préciser le type de support C'est que j'ai l'habitude d'exprimer les densités de cellules en cell/mL et non pas en cell/puits.
Je souhaite travailler en plaque 96 puits, donc surface d'ensemencement de 34mm² environ...
Voilou

[inviteae6c05c4]

Le mieux, c'est toujours de s'exprimer en cellules/cm².

Pour répondre à ta question, utilisant des cellules primaires relativement fragiles, j'ensemence minimum à 3500/cm² donc pour une lignée, tu dois pouvoir descendre sous cette valeur.

Après, tout dépend aussi de la question que tu poses, par exemple, à la fin de ta manip, veux-tu que tes cellules soient à 50% ou à sub-confluence ? Et également, tout dépend de ta densité à confluence (pour moi c'est autour de 70/80 000 /cm²)

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite2d571b60]

Merci pour ta réponse.
Je vais essayer de travailler en cellules/cm², c'est vrai que cela me semble plus logique...
Je pense que je vais tenter quelques densités sur la durée de ma manipe pour voir comment se comportent les cellules...