Bonsoir,
Une petite question toute bête mais qui me taraude :
J'ai une protéine dans un tampon. J'applique une coloration.
Je fais 3 tubes :
1 : 2mL d'eau distillée = Absorbance 1
2 : 2mL de tampon = Absorbance 2
3 : 2mL de protéine dans le tampon = Absorbance 3
L'absorbance reelle de la protéine est :
Ar = Absorbance 3 - ( Absorbance 1+Absorbance 2) ?
Je ne suis plus sûr c'est juste pour confirmer ou pas.
Je vous remercie par avance !
Bonsoir,
Je ne vois pas d'objections.
Merci de ta réponse,
mais j'y repense... Sachant qu'il n'y a pas d'ajour d'eau distillée dans ma solution avec le tampon.
L'absorbance reelle de la protéine est :
Ar = Absorbance 3 - Absorbance 2 ?
Visiblement, c'est ce que je dois faire ... Mais c'est tellement implicite. Puis je trouve ça louche de pas enlever l'absorbance de l'eau distillée
Normalement l'eau distillée sert à faire le blanc. Donc quand elle est dans la cuve et que tu mesures l'absorbance, on remet les pendules à A=0.
Le tampon est bien en milieu aqueux non?
Oui.
En gros je fais une gamme étalon, de protéine en solution ( juste de l'eau distillée ) de concentration connue. Du coup, ben je soustrais l'absorbance de mes tubes de protéine avec l'absorbance de l'essaie avec l'eau. La pas de souci.
Après, je regarde l'absorbance du tampon. ( mais visiblement je ne dois pas soustraire l'absorbance avec l'eau distillée ... et ca m'étonne complètement )
Puis après, je regarde l'absorbance de mes tubes de protéines avec du tampon, sans eau distillée ( du coup je soustrais l'absorbance du tampon. Et de l'essaie à blanc avec l'eau non ? )
