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Absorbance



  1. #1
    Ebly

    Absorbance


    ------

    Bonsoir,

    Une petite question toute bête mais qui me taraude :
    J'ai une protéine dans un tampon. J'applique une coloration.

    Je fais 3 tubes :
    1 : 2mL d'eau distillée = Absorbance 1
    2 : 2mL de tampon = Absorbance 2
    3 : 2mL de protéine dans le tampon = Absorbance 3


    L'absorbance reelle de la protéine est :
    Ar = Absorbance 3 - ( Absorbance 1+Absorbance 2) ?

    Je ne suis plus sûr c'est juste pour confirmer ou pas.

    Je vous remercie par avance !

    -----

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  3. #2
    Edelweiss68

    Re : Absorbance

    Bonsoir,

    Je ne vois pas d'objections.

  4. #3
    Ebly

    Re : Absorbance

    Merci de ta réponse,

    mais j'y repense... Sachant qu'il n'y a pas d'ajour d'eau distillée dans ma solution avec le tampon.

    L'absorbance reelle de la protéine est :
    Ar = Absorbance 3 - Absorbance 2 ?

    Visiblement, c'est ce que je dois faire ... Mais c'est tellement implicite. Puis je trouve ça louche de pas enlever l'absorbance de l'eau distillée

  5. #4
    Edelweiss68

    Re : Absorbance

    Normalement l'eau distillée sert à faire le blanc. Donc quand elle est dans la cuve et que tu mesures l'absorbance, on remet les pendules à A=0.

    Le tampon est bien en milieu aqueux non?

  6. #5
    Ebly

    Re : Absorbance

    Oui.
    En gros je fais une gamme étalon, de protéine en solution ( juste de l'eau distillée ) de concentration connue. Du coup, ben je soustrais l'absorbance de mes tubes de protéine avec l'absorbance de l'essaie avec l'eau. La pas de souci.

    Après, je regarde l'absorbance du tampon. ( mais visiblement je ne dois pas soustraire l'absorbance avec l'eau distillée ... et ca m'étonne complètement )

    Puis après, je regarde l'absorbance de mes tubes de protéines avec du tampon, sans eau distillée ( du coup je soustrais l'absorbance du tampon. Et de l'essaie à blanc avec l'eau non ? )

  7. A voir en vidéo sur Futura

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