Bonjour,
Je bloque sur un calcul de dilution pourtant tout bête. Je dilue 600 µL d'un milieu de culture dans 400 µL d'éthanol. Je centrifuge le tout et resuspend mon culot dans 900 µL d'eau.
En fait il me semble que je fais une dilution 6/4 puis 6/9 ce qui revient à 1! A force de recalculer, je ne sais plus et j'aimerais vos avis ...
Merci par avance pour vos réponses.
tu ne peux pas diluer et avoir une dilution de 1 !
tu cherches a savoir quoi ? parce que là il manque des informations
Ma première dilution c'est : 600 µL de milieu dans 400 µL d'éthanol
Ma deuxième dilution c'est : resuspension de 600 µL de culot dans 900 µL d'eau
C'est tout bête mais ça me perturbe à calculer !!
600µL de culot ? c'est un culot liquide ? un truc insoluble dans l'éthanol ?
je comprends pas trop
non je centrifuge un mix milieu de culture/éthanol. Je récupère le culot que je dois resuspendre en théorie dans 600 µL d'eau (car j'ai prélevé 600 µL de milieu) mais pour la suite de la manip, je suis obligé de resuspendre dans 900 µL, ce qui me fait une dilution supplémentaire non ?
Bonsoir,
La premiere etape n'est pas une dilution. C'est une precipitation.
Imaginons que tu ais 3 mg de ton "truc d'interet" dans 600 uL de milieux. Tu rajoutes ton ethanol. Le truc precipite. Tu centrifuges et tu elimines le surnageant. Tu te retrouve donc avec 3 mg de ton truc d'interet au fond de ton eppendorf.
Ensuite tu resuspend le culot dans 900 uL d'eau. Tu as donc 3 mg dans 900 uL de solution.
Tu es donc passe d'une concentration de 0.5mg/100uL a une solution de concentration 0,333mg/100uL. C'est une dilution au 2/3
Dernière modification par vpharmaco ; 04/07/2012 à 22h41.
