Nested PCR

[invite5776dee8]

Bonjour,
Je souhaite réaliser une Nested PCR afin d'identifier un évènement très rare dans mon échantillon. Mes premiers essais montrent une amplification très faible. Y a t'il un problème à réaliser une Nested sans dilution (Ni diluer l'extrait d'ADN, ni le produit de la première PCR)? Est-ce que je ne risque pas d'obtenir des produits non voulus?

Merci d'avance
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[inviteebd93464]

Bonjour,
En principe pour réaliser la Nested il faut juste utiliser le produit de la première PCR.
Normalement vous ne devriez pas avoir de résultat indésirable sauf en cas de contamination ou un problème de programme au niveau de la température d'hybridation.