[Biochimie] Chromatographie échangeuse d'anions avec salting-out
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Chromatographie échangeuse d'anions avec salting-out



  1. #1
    invite97983c4a

    Chromatographie échangeuse d'anions avec salting-out


    ------

    Bonjour,

    Je me retouve face d'un exercice dont je ne suis pas sûr si je l'ai bien résolu.
    L'énoncé est le suivant: Une solution renfermant les protéines suivantes, albumine (pI = 4,6) , uréase (pI=5,1) et myoglobine (pI=7,5) est déposée sur une colonne d'échangeuse d'anions à pH = 6,5. La colonne est lavée avec un tampon pH 6,5 renfermant des quantités croissantes de NaCl. Dans quel ordre les protéines sortiront de la colonne?
    Ma réflexion: la myoglobine est la seule à être chargée +, donc elle n'est pas retenue. Les deux autres vont être retenues car chargées -, mais forcément avec des temps de rétention différents. Est-ce que l'albumine restera plus longtemps retenue car son pI est encore plus en-dessous du pH 6,5 que celui de l'uréase? Au début je me suis dit que peut-être ça a avoir avec la solubilité des protéines (salting-out), mais on n'a pas vu de moyen pour connaître à partir du pI l'ordre de précipitation de peptides en solution saline croissante?

    Merci pour toute réponse,

    oduespstra.

    -----

  2. #2
    noir_ecaille

    Re : Chromatographie échangeuse d'anions avec salting-out

    Le pI (pH isoélectrique) est le pH où la protéine est en principe de charge globalement neutre. C'est à dire là où elle est le moins chargée.

    Qu'en déduisez-vous ?

    Pour un pH plus alcalin (insaturation protonique des fonctions acides et basiques), elle sera davantage chargée :
     Cliquez pour afficher

    Pour un pH plus acide (saturation protonique des fonctions acides et basiques), elle sera davantage chargée :
     Cliquez pour afficher


    En espérant que ça vous aide

  3. #3
    invite97983c4a

    Re : Chromatographie échangeuse d'anions avec salting-out

    Bonsoir,

    Oui ça m'aide beaucoup!
    Super, merci

    Cordialement

  4. #4
    invite97b70e2e

    Re : Chromatographie échangeuse d'anions avec salting-out

    Bonsoir,
    Moi je n'ai pas très bien compris :/

  5. A voir en vidéo sur Futura
  6. #5
    noir_ecaille

    Re : Chromatographie échangeuse d'anions avec salting-out

    Citation Envoyé par Marilie Voir le message
    Moi je n'ai pas très bien compris :/
    Commencez par expliquer ce que vous penser comprendre, puis on reprendra là où ça coince.

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