Reconditionnement déchantillions pour histo

[invitebc795704]

bonjour à tous

Est-il possible de reconditionner du tissu adipeux non fixé et congelé en -80 pour faire des coupes en paraffine?

Cordialement

Kerg
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[piwi]

Je vois deux difficultés.
La première est que maintenant que le tissu est congelé il va s'abimer en décongelant. L'histologie serait moche.
En plus l'inclusion en paraffine suppose que vous passiez dans des bains d'ethanol puis dans une bain de solvant tel que l'histosol. Ces produits dissolvent les acides gras.

La seconde difficulté est contournable, la première me semble rédhibitoire.

Cordialement,
piwi

[invitebc795704]

Merci pour votre réponse

Je pensai bien à la première difficulté, si je veux couper au cryostat, dois-je l'inclure dans le tissu tek ou bien le couper directement?
Pour tout dire, j'ai l'habitude des echantillons inclus mais n'ai jamais coupé de tissu congelé directement. Sachant que mon échantillon n'est pas fixé mais a été congelé directement dans l'azote liquide puis conservé à -80, puis je disposer directement sur le cryostat pour le couper?

[piwi]

En principe on inclue préalablement dans une cryomatrice que l'on va refroidir ensuite à -80°C.
Là encore vous allez avoir un souci. Votre pièce est déjà à -80°C. Du coup quand vous allez la plonger dans la cryomatrice cette dernière va immédiatement congeler avant que vous n'ayez le temps de placer correctement votre pièce. Comme je le disais plus haut, vous ne pouvez pas réchauffer l'échantillon. Je ne sais pas trop quoi vous conseiller du coup.

Cordialement,
piwi

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