Bonjour, on a fait des lames de cytospeen de cellules épithéliales du limbe qu'on a congelé et on va faire un marquage à la vimentine et e5. On voudrait savoir quel est le meilleur moyen pour fixer les cellules. On possède du paraformaldéhyde, du méthanol et du dako faramount et surement d'autres choses.
Y a pas photo, vous allez devoir mettre au point un petit protocole de test. Car chaque anticorps possède son fixateur préféré.
Ok merci. Mais le pb c'est qu'on possède qu'une seule lame de chaque type donc on peut pas faire de test. Vous sauriez pas à quel marqueurs correspond la e5 et la vimentine?
La e5 je ne sais pas mais la vimentine constitue les filaments intermédiaires de la cellule, et on l'utilise comme marqueur des cellules mésenchymateuses.
Greg
Excusez moi, je vouais dire quels fixateurs après marquage vimentine et e5?
Par défaut, la plupart des gens utilisent le paraformadéhyde (PFA) pour fixer les cellules. Par contre tu as parlé de fixation après immunomarquage...habituellemen t on fait l'inverse on fixe puis on marque. Sinon, je pense que l'optimisation du fixateur serait à faire dans le cas où il y a des problèmes de marquage.
Greg
Ok merci beaucoup.
