Sélection de lignées stables
Bonjour à tous.
Mon labo a acheté une lignée stable Cas9 MDA-MB-231 (cancer du sein). Elle porte un gène de résistance à l'hygromycine. Dans ma data-sheet il est écrit que pour la sous-culture, il faut remplacer le milieu de sélection par du milieu sans antibiotiques pendant 6h. Puis rincer au PBS, trypsiner et ensemencer à un ratio 1/2 ou 1/4.
Ma question est la suivante : pourquoi devoir remplacer le milieu 6h avant de passer les cellules? Est-ce que l'hygromycine a un effet sur la trypsine? Ou alors est-ce que je ne dois faire ça que quand je veux ensemencer mes cellules pour une manip, et les passer "normalement" avec le milieu de sélection le reste du temps?
J'ai cherché sur internet et dans la littérature mais je n'ai rien trouvé... des idées?
Merci d'avance!
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