je veux induire l'expression de ma proteine chez la levure pichia normalement cette proteine doit etre excreté hors de la levure.j'ai fait un preculture dans le BMGY et apres dans le BMMH( 0.5% methanol) à 30°c.
j'ai utilisé 3 types de plasmides ppicz, ppiczalpha et pGap.
le probleme que j'ai un production de ma proteine mais elle reste toujours dans la levure et ne sorte jamais .c'est dans les tois types de plasmides.
j'ai pas une explication et meme pas une idée pour induire l'expression de ma proteine et la produie vers l'exterieu de la levure