Repiquage sur milieu YPD de S. cerevisae

[inviteb853f23b]

Bonjour,

je dois effectuer un repiquage d'une culture de levures de Saccharomyces cerevisae (milieu complet YPD). Pouvez vous m'indiquer le mode d'ensemencement que je peux utiliser pour cela? Dois-je effectuer une suspension (dense +/-)?
Ensuite il est indiqué (notice du kit mutagénèse de la levure Ade2) que l'on doit l'incuber à 28°C pendant 5 jours puis à utiliser de suite le jour du TP. Mais je ne possède pas d'étuve, comment est ce que je peux faire? à température ambiante cela va prendre plus de temps...est ce que la culture ne va pas être "abîmée"?...

Merci de vos réponses qui me seront précieuses...

biz

Luciole.d.bois
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[invitec9f0f895]

salut

Si tu pars d'une suspension liquide, il te faut au moins DO600nm=1 tu prend une anse de platine que tu trempes dedans et tu stries sur une boite YPD. Si c'est juste pour la diluer, tu prends 5 microlitres de ta culture que tu dilues dans 5ml et hop.

La levure pousse a temperature ambiante, mais plus doucement ca c'est sur! surtout qu'actuellement ca caille pas mal et que la nuit la temperature doit sacrement baisser. Je te conseillerai de trouver une etude a 30°C car sinon ca va mettre pas mal de temps a pousser.

Yoyo

[inviteb853f23b]

Salut, déja merci de me répondre...Et bien je pars d'une culture sur boite (milieu YPD)... Et je ne possède pas de spectropphotomètre. Dois-je faire une supsension? Quel est le mode d'ensemencement pourun repiquage? Pour l'incubation je ne peux pas faire autrement il n' y pas d'étuve...J'en conviens le labo n'est pas trop équipé pour la microbio...je vais même devoir manipuler autour d'un bec électrique! c'est pour dire...