Protéolyse ménagée

[invitee863e61a]

Bonsoir,

Un collègue du labo m'a demandé conseil et je me suis demandé si vous pourriez le renseigner mieux que moi: il veut purifier une protéine de façon très propre avant de lancer dessus une protéolyse ménagée (je pense à la PreScission Protease de GE Healtcare, c'est moi qui l'ai commandé )

Son souci est que son protocole de purification implique l'emploi d'inhibiteurs de protéases et qu'il ne se risquera pas à les enlever car sa protéine est peu stable. Je lui ai suggéré de trouver une purification supplémentaire, mais cela ne lui semble pas évident.

Auriez-vous plus de conseils, trucs, astues, bidouilles ou tout autre expérience dans le genre? Merci bien
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[invitee863e61a]

Up

(le dernier, promis)

[invitec9f0f895]

Salut

si sa proteine est peu stable ca n'est probablement pas lié a la présence de protéases, il peut donc apres sa purif se debarasser des inhibiteurs.
Maintenant faire une protéolyse ménagée sur une protéine instable .... bon courage il n'est pas sorti de l'auberge!

désolé mais je vois pas comment il peu faire.
Yoyo

[invitee863e61a]

Salut

si sa proteine est peu stable ca n'est probablement pas lié a la présence de protéases, il peut donc apres sa purif se debarasser des inhibiteurs.
Maintenant faire une protéolyse ménagée sur une protéine instable .... bon courage il n'est pas sorti de l'auberge!

désolé mais je vois pas comment il peu faire.
Yoyo

En staff, on a eu l'occasion de discuter de la pertinence d'utiliser cette manip pour ce qu'il veut faire. On lui a aussi proposé de dialyser avec un filtre adéquat.
Merci

[A voir en vidéo sur Futura]