Westernblot

[invite619c8b48]

Bonjour, j'ai effectué en laboratoire un WB et quelque chose me laisse perplexe.
Nous avons séparé le gel en 2 parties, une coloré au bleu de Croomassie et l'autre pour le transfert. Après transfert (séparé en 5 bandes), nous avons utilisé le NHS-biotine (sans anticorps) sur une des bandes. Les 4 autres bandes ont servi pour une réaction immunoenzymatique.

Je dois répondre à cette question : Quelle est l'utilité d'avoir utilisé le bleu pour le gel et la biotine pour la membrane? Quelle est la différence entre le bleu de Coomassie et le NHS-biotine?

Merci
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[Zellus]

Salut et bienvenue !

Tu peux détailler un peu s'il te plaît ?
Qu'est-ce que tu as déposé exactement sur ton gel (lysat cellulaire ...) ? Un seul échantillon ou plusieurs ? Dans combien de puits ?
Qu'est-ce que tu as observé dans tes différents puits ?
Comment as-tu fait la révélation pour les différentes bandes (NHS-biotine et réaction immunoenzymatique) ?
Merci !