bonsoir à tous ,
voilà j'ai un dossier sur une technique d'isolement d'une sous pop de lymphocytes T ( LT CD4+/CD25+ ou LT suppresseur) à faire à partir d'un echantillon de sang, pour celà il me faut faire un centrifugation du sang au préalable pour récupérer la galette de leucocytes.
la question est : quelles sont les conditions opératoire?? dontme sont inconnus...
- temps
- vitesse
- anticoagulant ou pas
- température
merci
je pense que l'anticoagulant est nécessaire. Sinon tu pars mal pour récupérer des cellules
bonjour ,
alors anticoagulant oui (EDTA) ,glycerol afin d'accelerer la precipitation des globule rouge ,puits centrifugation a 1500rpm ,pendant 10minutes (a une temperature dans les 17°c )on recupere la fameuse galette ,on realise un lavage avec du PBS NH4CL (afin de detruire les globules rouge qui ont pu contaminer lanneau) ,on re centrifuge (meme conditions) ,et la on recupere l'anneau formé a la surface du culot ( c tres delicat) et voila ,
j'espere tavoir aider unpe ,je suis en pleins dans ce tp justement
