bonjour,

je voudrais marquer une sonde à l'aide de la digoxigènine.
J'ai tous les réactifs nécessaires dans un Kit de chez Roche
mon pb se situe au niveau de l'hybridation de ma sonde avec de l'adn fixé sur une membrane.
JE cherche à savoir la composition du tampon d'hybridation. Sur le site de roche il me conseil d'utiliser le leur ce qui est commercialement normal et il me donne 3 compositions différentes :

Tampon 1 : High SDS buffer avec : 7% SDS; 50% formamide deionized; 5x SSC; 2% Blocking Reagent; 0,1% (w/v) N-lauroylsarcosine; 50mM Sodium phosphate, pH 7.0

Tampon 2 : Standard buffer + Formamide avec : 50% formamide deionized; 5x SSC; 2% Blocking Reagent; 0,1% (w/v) N-lauroylsarcosine; 0,02% SDS.

Tampon 3 : Standard buffer avec : 5x SSC; 1% Blocking Reagent; 0,1% (w/v) N-lauroylsarcosine; 0,02% SDS.

Le formamide étant toxique ma question est est ce que le tampon3 suffirait-il?

avez-vous une autre composition de tampon d'hybridation pour une sonde marquée à la digoxigènine?

Merci de me répondre au plus vite.

Scientifiquement votre
Kmilkaz