chroomatographie d'affinité

[invite759c3e8a]

Bonjour,
dans la chromatographie d'affinité, on élue:

1) soit avec une molécule qui a une plus grande affinité pour notre ligand greffé sur la matrice, cette molécule va donc rentrer en compétition avec la protéine à éluer et à forte concentration, notre protéine se détachera, pour ceci c'est ok.

2) Soit en changeant le pH ou la force ionique
là par contre, je ne comprends pas ce qu'il se passe?? je ne vois pas pourquoi le changement de l'un de ces 2 paramètres diminuerait l'affinité de la protéine pour le ligand :s

Merci de m'aider
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[invite935d76c1]

bonsoir !!!

si tu change le ph et/ou la force ionique ta protéine va changer de conformation et l'affinité pour
la matrice va changer et il suffira de peu pour l'éluer...
en clair le ph modifie les charges des acides aminés ->changement de conformation
idem pour la force ionique
et comme les protéines sont retenue en fonction d'un caractère ionique défini, un simple ion prendra la place de ta protéine ...