Bonjour a tous,
Je dois transduire des cellules avec le transgene GFP. Je souhaite selectionner les cellules GFP positives sans avoir a passer par le FACS, juste en utilisant un agent de selection comme le G418.
Seulement ma construction lentivirale ne comporte pas le gene de la neomycine phosphotransferase.
Je sais que je pourrais egalement utiliser une resistance a la puromycine, hygromycine, zeo, mais la encore je n'ai rien dans mon plasmide.
Savez-vous si je peux facilement sous-cloner l'un des ces genes dans mon plasmide lentiviral.
Pensez vous qu'une double transfection de mes cellules productrices (293T) soit une autre solution ?
Au meme moment que je les transfecte avec les plasmides MD.G/Dr8.91 et GFP je pourrais ajouter un vecteur lentiviral porteur du gene de resistance.
Je vous remercie pour toutes les idees que vous pourrez me donner.
Bonne journee et au plaisir de vous lire,
Bodum
-----