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TP: Cellules chlorophyliennes



  1. #1
    Laamiss-92

    TP: Cellules chlorophyliennes

    Salut, voici l'intitulé de mon TP: Pour suivre le développement de cellules d'Euglénes (algues unicellulaires), on les mets en culture, dans des millieux différents et on les expose au méme éclairement pendant 5jours.
    1)Concevez un protocole pour montrer que les cellules chlorophyliennes n'ont besoin que de molécules minérales (et d'eau). Présentez la composition de vos différents tubes a essai dans un tableau.
    Ce qui me pose probléme est la premiére partie de cette question, j'ai fait plusieurs recherches mais je ne trouve rien pour m'aider.
    Merci d'avance

    -----


  2. #2
    noir_ecaille

    Re : TP: Cellules chlorophyliennes

    Ces liens présentent une assez belle liste des milieux les plus utilisés pour l'étude bactérienne courante (alimentaire et pathogène).
    http://www2.ac-lyon.fr/enseigne/biot...o/milieux.html
    http://py.guillaume1.free.fr/site%20...ilieu_tube.htm
    http://py.guillaume1.free.fr/site%20...ndex.htm#index
    http://www.solabia.fr/solabia/produitsDiagnostic.nsf/0/C17A5F63CA187697C12574C900330B C8/$file/FT_BM071_v6.pdf
    http://www.intellego.fr/soutien-scol...erienne-/35588

    Un site plutôt sympa : http://py.guillaume1.free.fr/microbiologie.htm
    ___________

    Dans ce cas précis, a priori rien n'empêche de créer des milieux synthétiques de son crû.

    On peut utiliser des solutions telles que :
    - eau distillée
    - solution tampon minérale : mélange base faible + acide fort ou base forte + acide faible, avec un pKA adéquat (acide pour une culture acidophile, alcalin pour une culture basophile...)
    - une source de phosphate (éventuellement le tampon en question)
    - une source en fer, souffre, cuivre et autres micro-éléments et oligo-éléments
    - une source d'azote (ammoniaque/ammonium, nitrates, nitrites, atmosphère enrichie en di-azote...)
    - une source de carbone (culture sous cloche à CO2, solution calcaire [Ca2CO3] ou bicarbonatée...)

    Le tout à des concentrations connues, sauf pour les sources atmosphériques évidemment, on peut créer plusieurs milieux avec à chaque fois une source carbonée minérale différente + un témoin glucose -- deux utilités :
    1°) si rien ne pousse ailleurs, l'organisme étudié dépend de molécules organiques pour se procurer son carbone.
    2°) si on utilise un milieu type viande-foie + indicateur de pH, on peut tenter de mettre en évidence une souche "inerte au molécules organiques du milieu".

    Enfin... Tout ça sur la base de spéculations et de maigres restes
    _____________

    Pourquoi plusieurs milieux de culture ?
    Bah pour identifier la ou les possible(s) source(s) de carbone que l'organisme étudié est capable d'utiliser.

    Pourquoi connaître exactement la composition des milieux ?
    Afin de s'assurer le contrôle de certains paramètres -- ex : le pH, ce serait dommage de faire avorter un test parce que la culture est morte dans ses propres déchets ; la tonicité du milieu : certains organisme craignent l'hypotonicité, d'autres l'hypertonicité ; la toxicité du milieu : pas la peine de mettre du cyanure (source de carbone et azote) sauf si on pense que l'organisme étudié sait l'utiliser ; etc..

    Pourquoi un témoin avec source de carbone organique ?
    Parce que si même ce témoin échoue, on peut toujours exploiter les résultats : identifier un problème de température de culture, présence d'un contaminant discret (moisissures, bactéries éventuellement à pigment...), défaut de manipulation...

    Bref. Quelques pistes que j'espère pertinente

    N'hésitez pas à corriger !

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