Bonsoir,
Je souhaiterais savoir si dans le cas où l'on ne dispose pas de spectrophotomètre, serait-il possible de doser la concentration de nos ADN en les faisant migrer avec un ADN de référence dont les bandes ont une concentration connue?
la métode est-elle viable (car elle n'est pas citée dans la littérature) mais aussi si c'est le cas, serait il possible d'avoir plus de détails ou de liens pour approfondir ma recherche
merci
ca se fait, mais c'est tres indicatif. Il faut veiller a faire plusieurs dilutions pour avoir une intensité comparable avec la référence, et surtout comparer un echantillon X avec une référence de taille similaire.
Ca suffit pour avoir un ordre d'idée (pour les transformations, PCR, ratios de ligation, etc) mais pas pour les études quantitatives.
Bonjour flyingbike. merci pour ta réponse.
tu dis juste, c'est pour une PCR simple. tu peux me donner plus de tdétails sur les dilutions à effectuer pour ajuster l'échantillon par rapport à l'ADN de référence?
Je pense qu'il veut dire qu'il faut que la concentration de ton échantillon doit être compris dans la gamme de concentration de ton marqueur. Si elle est au dessus ou en dessous, tu ne pourras pas calculer sans être certaine du résultat.
kamor a lu dans mes pensées ! Il faut que ton produit ait une concentration comparable a celle de ton marqueur, parce que s'il y a un facteur 10, l'oeil ne suffit pas !
Non non je ne suis pas un clone de The Mentalist, c'est juste que c'est l'un des principes de base de tout dosage par comparaison d'une gamme
Salut,
Il existe aussi des marqueurs de taille qui permettent de quantifier ton échantillon.
Dans tous les cas, je te conseillerais de quantifier les bandes de ton gel avec un logiciel comme ImageJ si tu veux avoir la meilleure approximation possible de ta concentration.
