Bonjour tout le monde, je vous sollicite car je ne comprend pas véritablement le fonctionnement de la methode MLPA, et l'utilité de la "ligation" mis a part que celle ci permet de reperer une deletion ou une duplication d'exons!
Merci de votre aide
Bonjour,
Déjà là :http://en.wikipedia.org/wiki/Multipl..._Amplification
Et puis la ligation c'est ce qui fait toute la particularité de cette technique! Une des sondes contient une amorce et l'autre sonde contient la deuxième amorce. Si une des deux sondes ne peut pas s'hybrider (par exemple si il y a une délétion), il n'y a pas de ligation et donc pas d'amplification. Mon explication est un peu basique, je ne suis pas une promais en attendant mieux c'est déjà ça!
J'avais deja consulter le lien mais la bio mol en anglais c'est pas top ^^
Ce que je ne comprend pas vraiment c'est pourquoi il y aurai cette "spécificité" de la ligase? pourquoi ne lierait t'elle pas les sondes entre elle qu'il y ait hybridation ou pas? Est-ce du au fait que l'on ajoute la ligase au moment de l'hybridation ?
Ton explication est basique mais mérite d'être plus clair que celle de mon prof ^^
Merci de ton aide
De rien! Alors je ne peux pas te répondre de façon certaine car je n'ai jamais pratiqué cette technique, nous l'avons abordée rapidemment au détour d'une diapo...
Mais je pense que même si cette ligase n'est pas spécifique aux sondes hybridées (et donc qu'elle lie aussi les sondes qui ne le sont pas); et bien de toute manière, la PCR n'amplifie que la partie double brin donc que si les sondes se sont hybridées.
