Bonjour,
Je vous sollicite car je ne comprend pas véritablement le fonctionnement de la méthode Dot Blot utilisée dans le cadre de recherche de mutations ponctuelles connues.
J'ai eu un cour mais le prof n'a pas été très explicite.
Merci de votre aide
salut, en fait cette méthode est assez simple,
on prend l'ADN d'un patient qu'on pense atteint d'une mutation connue et on fait une hybridation avec deux sondes :
- une sonde sans mutations
- une sonde avec mutation
puis on regarde par autoradiographie (si mes souvenirs sont bons).
°si on a un juste un spot avec l'hybridation de la sonde normale et aucun avec la mutée, le patient ne portera pas la mutation (il sera homozygote sain)
°si on un juste un spot avec l'hybridation de la sonde mutée et aucun avec la normale, le patient sera homozygote muté
°si on un 2 spots apres hybridation avec les 2 sondes on pourra dire que ce patient est hétérozygote
voila, je ne sais pas si mes explications sont tout a fait claire, mais c'est a peu pres ça la méthode^^
