Bonjour
Une petite question technique pour les spécialistes (s'il y en a).
Je cherche a Produire des Lenti permettant l'expression d'un shRNA.
Dans le vecteur permettant l'expression du plasmide dans les cellules eucaryotes (alternativement il sert aussi à la production des particules), il y a juste après le site d'insertion du shRNA un site appelé "cPPT" pour central Polypurine Tract.
Quelqu'un sait à quoi sert ce machin et comment ça fonctionne ?
MErci d'avance
Bon, finalement j'ai eu ma réponse :
In :Central polypurine tract
A retroviral RNA genome contains short stretches of purines, called polypurine tracts (PPTs), near the 3′-end. These PPTs function as RNA primers for plus-strand DNA synthesis during reverse transcription. Complex retroviruses (including HIV-1) contain a second, more centrally located PPT that provides a second site for initiation of DNA synthesis. Reverse transcription forms an overhanging DNA flap in this region, which might form a triple-stranded helix, and which has been proposed to function as a nuclear targeting element.
Host factors exploited by retroviruses.
Goff SP.
Nat Rev Microbiol. 2007 Apr;5(4):253-63. Epub 2007 Feb 26. Review.
PMID: 17325726 [PubMed - indexed for MEDLINE]
En gros et pour faire simple ce motif PPT sert pendant la RT de ton ARN en ADN, c'est un motif qui reste après action de la RNaseH et qui sert ainsi d'amorce pour la RT pour l'initiation de synthèse du 2ème brin d'ADN.Envoyé par Flyingbike
