PCR multiplex

[invite326288e4]

Bonjour tout le monde

Voila, je vais devoir me mettre la PCR multiplex d'ici peu et je cherche actuellement les protocoles intéressant sur internet pour me faire une idée.

J'en ai déjà trouvé quelques uns mais n'en ayant jamais fais je viens vous demander conseil

En fait je vais devoir réaliser des PCR multiplex (1 couple et plusieurs matrices) et je cherche à obtenir des amplicons de grande taille (au delà de 1kb...).
J'aurai donc souhaité savoir, si vous avez déjà fais ce genre de manip, quels sont les protocoles qui marchent le mieux... Parce que je suppose que selon le niveau de multiplexage et la taille des amplicons souhaités (qui doivent être de très bonne qualité pour moi) tous ne se valent pas...

Merci d'avance pour vos réponses
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[Flyingbike]

1kb ca n'est pas vraiment grand comme amplicon. Tu peux déjà commencer a te renseinger sur les différents types de polymérases qui ont des vitesses et des efficacités très variables, certaines sont plus adaptées aux longs amplicons que d'autres.

[invite326288e4]

OK, merci. Je vais aller regarder ça... ^^

En même temps j'avoue que je ne me rends pas bien compte de ce qui peut être produit comme taille en multiplex...j'ai lun protocole où on pouvait aller jusqu'à 4kb, peut on monter encore plus haut? Moi il va falloir que je produise des fragments longs, mais je sais pas trop combien encore...