Test de Prénylation en fluorescence

[invited4483792]

Bonjour à tous,

Voici quelques semaines que j'ai commencé ma thèse en biologie et que je me casse les dents sur un problème qui parait simple mais devient vite complexe quand on ne peut pas faire de radioactivité :'(.

Concrètement :
Je voudrait étudier de préférence in vivo la prénylation d'une protéine Rab escortée par Rep1 (Rab Escort Protéin 1) à l'enzyme RGGT (Rab GeranylGeranyl Transférase) qui doit donc ajouter un groupement géranylgéranyl à ma protéine Rab.
J'ai étudié la littérature notamment celle de Miguel Seabra mais tout est basé sur de la radioactivité hors ma chef ne veux pas avoir recours à la RX ...

Quelqu'un aurait une idée ou un protocole alternatif ?

Merci d'avance
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[vpharmaco]

Bonjour,

si tu veux te passer de radioactivité, tu va devoir faire un peu de chimie.
Tu peux en particulier lire les travaux du groupe d'Edward W Tate (chloresteroylaytion, myristoylation, palmitoylation..) et en particulier:
http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/20209562

Cordialement

[invited4483792]

Je te remercie pour ta réponse précise et rapide, je n'ai pas eu accès à la revue via BiblioVie ni BiblioInserm, j'ai effectué une requête auprès de l'auteur en espérant qu'il me réponde .
Je te dirais si je m'en sort car je suis un très mauvais chimiste :$ ^^ !

See U