Immuno-précipitation/liaison protéineA-Fc

[invite43a76894]

Bonjour,

Juste une petite question, Après une IP à l'aide de billes de sepharose couplées à la protéine A, comment déstabiliser les liaisons protéine A-Fc des Ig sans abimer ma protéine d'intérêt?

merci d'avance.
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[invite71f23525]

Plusieurs solutions mais après il faudra optimiser : augmentation de la force ionique (tu incubes par exemple ton complexe dans un tampon assez concentré en NaCl, entre 100 et 500 mM, après il faut optimiser), ajout d'un détergent (triton, CHAPS (assez doux donc risque de ne pas marcher), surtout pas de SDS bien sûr), probablement d'autres solutions sont envisageables.