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Agroinfiltration contact



  1. #1
    petitelectron

    Red face Agroinfiltration contact

    Bonjour !
    Je cherche quelqu'un qui aurait déjà fait de l'agroinfiltration car voilà je dois agroinfiltrer un certain nombre de bactéries dans du tabac, en extraire les protéines, les doser puis mesurer la fluorescence de mes extraits .. Et comme je suis peu encadrée et que c'est la première fois pour moi que je dois faire une manip de A à Z je cherche activement quelqu'un qui pourrait me rassurer sur certain point.
    Merci à vous

    -----


  2. Publicité
  3. #2
    malesore

    Re : Agroinfiltration contact

    Bonjour,

    Je peux t'aider. Quelles sont tes interrogations ?
    Seul l'étang calme reflète les étoiles

  4. #3
    petitelectron

    Re : Agroinfiltration contact

    J'ai pleins de questions bêtes -_-' (je m'excuse d'avance) : déjà pour l'agroinfiltration en elle même j'ensemence mes bactéries dans un milieu LB complémenté avec des antibiotiques je dois ensuite mesurer l'absorbance à partir d'un blanc de calibration composé de LB et d'antibiotique (je considère cette concentration comme zéro donc) ensuite on me demande de calculer le volume de tampon MMA dans lequel je dois resuspendre me bactéries pour obtenir une DO=1 et là je ne comprends pas cette étape .. ca à l'air simple mais je bloque ^^ au final j'aurai la même DO pour chaque tube mais ce ne sera pas pour autant la même concentration de bactérie ???
    bref, je centrifuge, je largue le surnageant je dois resuspendre dans du MMA et avoir de nouveau une DO=1... pourquoi faut il absolument avoir une DO de 1 avec ce tampon ..
    Aussi, dans ce tampon MMA il y a de l'acétosyringone... je ne sais pas quel est son rôle exactement...
    De plus, je dois faire un devis pour mes protocoles, je ne vois vrt pas où trouver du LB ou encore du MMA et j'en passe

  5. #4
    malesore

    Re : Agroinfiltration contact

    La mesure de la DO te permet au contraire d'avoir un idée de la concentration de tes bactéries, voilà pourquoi tu normalises à DO 1.

    L'acétosyringone améliore la transformation des plantes.

    Le LB et les tampons nécessaire à la fabrication du MMA, tu en trouves chez Sigma par exemple.
    Seul l'étang calme reflète les étoiles

  6. #5
    petitelectron

    Re : Agroinfiltration contact

    impossible de trouver le prix d'un kit (protein assay) sur bio-rad .... insupportable

  7. A voir en vidéo sur Futura

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