Comment extraire un gène??
Bonjour à tous,
Durant ma révision de Bio-Mol, je me suis posée une question sur la méthode de clonage des gène et le choix des enzymes de réstriction.
Ma question est la suivante:
On a un gène d'intérêt de séquence inconnue, on veut le transférer dans une cellule bactérienne ou végétale. Comment faire pour l'extraire? et quelle enzyme de restriction choisir si on doit le cloner dans un vecteur type pGEM-T vector
Cordialement.
Salut
Ca depend de l'interet que l'on a pour le gène considéré. Mais la méthode la plus classique est de faire une banque d'ANDg et de chercher les clones exprimant le phénotype que l'on cherche.
YOyo
Bonjour à toi yoyo,
Le gène considère est un gêne de résistance contre une larve, la séquence ,inconnue bien sure, doit être extraite à partir d'une bactérie et cloner dans une cellule végétal. Comment procéder à ce transfert et comment choisir les enzyme qu'il faut :/ c'est ce qui me tracasse :'(
salut
Tu ne connais pas des paralogues?
Si tu n'as pas d'autres infos, alors la seule chose est de tester differentes enzymes. Si le génome est AT riche alors prendre une enzyme qui a un site GC riche, il sera moins fréquent tu auras donc plus de chance de cloner ton gene intact.
YOyo
Merci pour tes réponses Yoyo, elles m'ont beaucoup aider
Bonne continuation.
Cordialement.
