Culture bactérienne sur milieu + IPTG

[invite007117a5]

Bonjour à tous,

Je viens de découvrir ce forum et je le trouve super. J'espère pouvoir apporté ma contribution à cette petite communauté rapidement, et vice versa. En quelques mots, je suis titulaire d'un M2 génétique et en 1ère année de doctorat dans le même domaine.
Je travaille sur la mise au point d'un nouveau projet et je réfléchis à différentes possibilités. J'ai besoin de vos avis pour une question un peu basique (et méthodologique) pour ceux habitués à la bactério...
1- Peut-on mettre de l'IPTG dans du LB+agar, si oui à quel moment ? (Avant ou après autoclave)
2- L'IPTG peut-il inhibé la croissance bactérienne s'il n'est pas métabolisé ?

Ma seconde question peut sembler étrange, mais en fait l'idée serait de faire pousser des bactéries en tapis avant d'activer la beta-gal dans une partie de ce tapis.

Je n'ai jamais trop fait de bactério, donc je prends les avis ! Si vous avez des sources biblios, n'hésitez pas non plus, je prend.
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[invite03e38661]

Bonjour,

Oui tu peux mettre de l'IPTG dans ton LB agar quand celle ci est refroidie mais encore liquide. Il sert d'inducteur de l'operon lactose. Je ne crois pas qu'il ralentisse la croissance bactérienne. De toute manière ça pousse bien à 37 degré sur la nuit!

En espérant t'avoir aidée

[invite36fd0274]

je travail actuellement avec l'IPTG pour induire le géne d'un cytochrome, l'IPTG je l'ajoute après que les bactéries soit à l'approche du plateau (0.9 OD 600nm) l'IPTG ne ralentit pas apparament la croissance, c'est plus la protéine surexprimée qui peut la ralentir.