Bonjour à tous,
J'ai actuellement un problème concernant la différentiation de monocytes humains en macrophages.
Ces monocytes sont obtenus via des buffy coat (couches leucocytaires) par un protocole d'isolation par adhésion.
En bref, après une première séparation par gradient de ficoll et une série de centrifugation. Les monocytes sont isolés des autres types cellulaires par une étape d'adhésion de 1h sur plaque PRIMARIA suivit d'un lavage.
Ma question porte sur la durée necessaire pour obtenir une différenciation de monocytes en macrophages correcte. Dans mon équipe on m'a suggéré trois durées différentes : 6, 8 et 10 jours, sachant que l'on utilise ni M-CSF ni GM-CSF.
Quelqu'un aurait il des information sur la question? J'ai essayé de creuser la question sur pubmed, mais je n'arrive pas à trouver un protocole qui marche par adhésion simple (sans adjonction de M-CSF ou GM-CSF)
Merci d'avance!
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