Utilisation de la trypsine pour un test de repliement des protéines

[invite0dfe5571]

Bonjour à tous,

Je viens de découvrir une nouvelle méthode qui consiste à traiter des extraits cytoplasmique avec de la trypsine (1, 3, 10...µg/ml) pendant 5 min, faire un western blot avec un anticorps pour la (les) protéine(s) d'intérêt et regarder si les bandes observées sont à hauteur attendue (bonne taille en KDa), ou avec des tailles inférieures ou si elles ont complétement disparu. Si les protéines sont résistantes à un traitement à la trypsine à forte concentration c'est qu'elles sont bien repliées et donc moins accessibles à cette protéase ?
Je ne suis pas certaine de ma conclusion et de mon explication, alors si quelqu'un utilise cette méthode, son éclairement sera le bienvenu !

Merci beaucoup,

Cécile
-----

[Zellus]

Salut,

Oui c'est bien ça.
Ou alors la protéine étudiée n'a aucun site de coupure, mais ça reste rare comme cas de figure ...