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Utilisation de la trypsine pour un test de repliement des protéines



  1. #1
    cecilef

    Lightbulb Utilisation de la trypsine pour un test de repliement des protéines

    Bonjour à tous,

    Je viens de découvrir une nouvelle méthode qui consiste à traiter des extraits cytoplasmique avec de la trypsine (1, 3, 10...µg/ml) pendant 5 min, faire un western blot avec un anticorps pour la (les) protéine(s) d'intérêt et regarder si les bandes observées sont à hauteur attendue (bonne taille en KDa), ou avec des tailles inférieures ou si elles ont complétement disparu. Si les protéines sont résistantes à un traitement à la trypsine à forte concentration c'est qu'elles sont bien repliées et donc moins accessibles à cette protéase ?
    Je ne suis pas certaine de ma conclusion et de mon explication, alors si quelqu'un utilise cette méthode, son éclairement sera le bienvenu !

    Merci beaucoup,

    Cécile

    -----


  2. #2
    Zellus

    Re : Utilisation de la trypsine pour un test de repliement des protéines

    Salut,

    Oui c'est bien ça.
    Ou alors la protéine étudiée n'a aucun site de coupure, mais ça reste rare comme cas de figure ...

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