Dilution en cascade

[invitecebe4331]

Bonjour,
Je doit réaliser une gamme étalon de la protéine standard BSA (Bovin Serum Albumin) pour doser les protéines de mes échantillons avec la méthode
Bradford.
la solution mère (Protéine standard) est à 1,47 mg/ml

Tube 1 : Protéine standard à 0 mg/ml
Tube 2 : Protéine standard à 0,25 mg/ml
Tube 3 : Protéine standard à 0,5 mg/ml
Tube 4 : Protéine standard à 1 mg/ml
Tube 5 : Protéine standard à 1,4 mg/
Le volume final doit rester 100 µL dans chaque tube.
Le solvant étant le tampon PBS.

Comment je doit procéder ?

Merci
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[Taz_79]

Salut,

Il suffit juste d'appliquer la formule CixVi = CfxVf
où Ci = 1.47 mg/mL ta solution mère
Vi = x c'est le volume initial que tu recherches pour faire ta gamme étalon
Cf = c'est la concentration de chaque tube de ta gamme étalon
Vf = c'est ton volume final 100 uL

Une fois que tu as trouvé ton volume initial pour chaque tube, tu le complètes avec du PBS jusqu'à arriver à 100uL de solution dans chaque tube.

Voila, Bonne soirée.

[invitecebe4331]

Merci Taz_79,
Mais voila, je voulais faire une dilution en cascade, c'est à dire prendre un volume d'un tube et l'ajouter au tube suivant. Le volume final dans chaque tube doit rester 100 µL.
Merci

[Taz_79]

Ben dans ce cas là tu prends ta solution solution mère à partir du tube précédent. C'est à dire que tu commences tout d'abord par créer ton tube 5 puis pour faire ton tube 4 tu prélèves dans le tube en l'utilisant comme solution mère puis tu complètes avec du PBS jusqu'à avoir un volume final de 100 uL. après pour faire ton tube 3 tu prélèves dans le tube 4 et ainsi de suite.

[A voir en vidéo sur Futura]