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préparation d'une gamme etalon



  1. #1
    jul13

    préparation d'une gamme etalon

    Salut à tous,
    je viens de commencer un stage en biologie moléculaire et il y a beaucoup de manipulation de TP que j'ai oublié.
    En faite je dose une activité enzymatique avec un réactionnel composé de 125 µl de tampon, 50 µl de solution enzymatique et 75 µl de substrat pNP-glycoside
    Le milieu réactionnel est incubé à 37°C pendant 10 min. La réaction est arrêtée par ajout de 2 ml de carbonate de sodium (2 %, p/v). L’activité enzymatique se manifeste par l’apparition d’une coloration jaune caractéristique du paranitrophénol (pNP) libéré dans le milieu.
    -Ma question comment je dois préparer ma gamme étalon de paranitrophénol (pNP) pour calculer l'activité spécifique de l'enzyme?

    Merci d'avance pour vos réponses

    -----


  2. #2
    minou3

    Re : préparation d'une gamme etalon

    Votre gamme étalon? Parlez-vous de faire votre courbe d'étalonnage pour faire la conversion d'une densité optique à une concentration (en µM)?
    Dernière modification par minou3 ; 06/02/2013 à 04h13.

  3. #3
    jul13

    Re : préparation d'une gamme etalon

    oui tout à fait je veux déterminer la quantité de produits libéré dans le milieu
    Merci

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