[Biologie Moléculaire] Témoins positifs et négatifs PCR
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Témoins positifs et négatifs PCR



  1. #1
    invitecd71fbc7

    Témoins positifs et négatifs PCR


    ------

    Bonjour,

    Une amplification par PCR doit apparemment toujours être accompagnée de 3 témoins:
    - un témoin négatif où l'ADN est remplacé par de l'eau (vérifier contamination) -> OK
    - deux témoins positifs: je ne comprends pas la différence entre ces deux témoins ni à quoi ils servent.

    Merci d'avance à ceux qui sauront m'éclairer

    -----

  2. #2
    invitecd71fbc7

    Re : Témoins positifs et négatifs PCR

    De plus, ce n'est pas très clair pour le témoin négatif non plus puisque ça ne contrôlera que les contaminations par l'ADNc destiné à être amplifié puisque les amorçes sont spécifiques du segment qu'on veut amplifier...
    On ne détectera pas tout autre ADN contaminant, si?

  3. #3
    Flyingbike
    Modérateur*

    Re : Témoins positifs et négatifs PCR

    Citation Envoyé par roro91 Voir le message
    De plus, ce n'est pas très clair pour le témoin négatif non plus puisque ça ne contrôlera que les contaminations par l'ADNc destiné à être amplifié puisque les amorçes sont spécifiques du segment qu'on veut amplifier...
    On ne détectera pas tout autre ADN contaminant, si?
    Cela permettra de voir si un de tes composants est contaminé avec un ADN qui peut produire du signal, du coup si tu as un signal dans ton contrôle négatif, tu ne sauras pas si le signal obtenu dans tes échantillons est spécifique ou lié à une contamination (permet donc d'éviter les FAUX POSITIFS)
    Le contôle positif le plus courant est d'ajouter un fragment d'ADN connu dont tu es sur qu'il produira le signal attendu. De la même manière, si tu n'as pas de signal dans ton contrôle positif tu ne sauras pas si tes échantillons sont négatifs ou si l'amplification n'a pas fonctionné (permet donc d'éviter les FAUX NEGATIFS)

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