bonsoir tout le monde ,
je rencontre un sérieux problème avec gels 1D je n'arrive plus à en faire correctement ,
les bandes sont presque invisibles ? les bandes ne sont pas bien tracées , ça ne ressemble à rien ?
pourtant après dosage la quantité de protéines semble suffisante j'ai par exemple 1.6µg/µl je ramène tout les échantillons à cette concentration , j'ai engagé une plus grande quantité de protéine 65µg! j'ai vérifié les pH des tampon tris pour les deux gels (concentration et séparation) je travaille avec la même source
je laisse migré à 12 mA constant toute la nuit (voltage max et puissance max), et quand je lance deux gels je mets à 24 mA et pareil le reste au max
je voudrai savoir aussi si le fait de d'augmenter la tension un peu peut provoqué ça ? je fais ça parfois quand je viens le matin pour activer la migration , mais j'ai toujours eu l'habitude d'avoir de beau gels?!!
merci de m'aider c'est vraiment urgent
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