Kit Miniprep NucleoSpin Plasmid

[invite96ea98dc]

Bonjour a tous, je suis en stage, et j'ai récemment utilisé le kit NucleoSpin Plasmid qui permet d'extraire de l'ADN plasmidique de bactéries.

J'utilise 5 tampons différents et j'aimerai connaitre leur composition, ou du moins comment ils fonctionnent.

Tampon A1 = Utilisé pour ressuspendre les bactéries centrifugées
Tampon A2 = Tampon de lyse
Tampon A3 = Tampon de neutralisation (Contient de l'éthanol)
Tampon A4 = Tampon de lavage
Tampon AE = Tampon d'élution

Voila je cherche juste a savoir comment ces tampons permettent la lyse, le lavage etc...

Merci de votre aide
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[TanguyE]

Bonjour,

Je crois pas qu'on puisse trouver la compo des buffers de MN ( vu qu'ils les vendent séparément pour une petite fortune!!) mais par contre on peut connaitre ceux d'un kit similaire Qiagen: http://www.qiagen.com/products/catal...-kit#resources
Dans le handbook, y'a la compo des buffers et normalement ils correspondent plus ou moins aux tiens.

Cordialement

[invite96ea98dc]

Super je vais regarder ça, mais je voudrait pas connaitre exactement la composition, juste savoir quel type de solution c'est, pour savoir comment elle agit sur la colonne, par exemple le tampon d'élution, par quel moyen décroche-t-il l'ADN de la colonne, etc...

Merci

[invite444a246d]

Page 6 du document.

"QIAGEN plasmid purification protocols are based on a modified alkaline lysis procedure, followed by binding of plasmid DNA to QIAGEN resin under appropriate low-salt and pH conditions. RNA, proteins, dyes, and low-molecular–weight impurities are removed by a medium-salt wash. Plasmid DNA is eluted in a high-salt buffer and then concentrated and desalted by isopropanol precipitation."

Cordialement,

[A voir en vidéo sur Futura]

[invite96ea98dc]

Merci chamouulox, faudrait que j'apprenne à lire plus attentivement les manuels

[TanguyE]

Merci chamouulox, faudrait que j'apprenne à lire plus attentivement les manuels

Ça peut aider