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Kit Miniprep NucleoSpin Plasmid



  1. #1
    waaxx

    Question Kit Miniprep NucleoSpin Plasmid

    Bonjour a tous, je suis en stage, et j'ai récemment utilisé le kit NucleoSpin Plasmid qui permet d'extraire de l'ADN plasmidique de bactéries.

    J'utilise 5 tampons différents et j'aimerai connaitre leur composition, ou du moins comment ils fonctionnent.

    Tampon A1 = Utilisé pour ressuspendre les bactéries centrifugées
    Tampon A2 = Tampon de lyse
    Tampon A3 = Tampon de neutralisation (Contient de l'éthanol)
    Tampon A4 = Tampon de lavage
    Tampon AE = Tampon d'élution

    Voila je cherche juste a savoir comment ces tampons permettent la lyse, le lavage etc...

    Merci de votre aide

    -----

    Fichiers attachés Fichiers attachés
    Cordialement, Jacquet C

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  3. #2
    TanguyE

    Re : Kit Miniprep NucleoSpin Plasmid

    Bonjour,

    Je crois pas qu'on puisse trouver la compo des buffers de MN ( vu qu'ils les vendent séparément pour une petite fortune!!) mais par contre on peut connaitre ceux d'un kit similaire Qiagen: http://www.qiagen.com/products/catal...-kit#resources
    Dans le handbook, y'a la compo des buffers et normalement ils correspondent plus ou moins aux tiens.

    Cordialement

  4. #3
    waaxx

    Re : Kit Miniprep NucleoSpin Plasmid

    Super je vais regarder ça, mais je voudrait pas connaitre exactement la composition, juste savoir quel type de solution c'est, pour savoir comment elle agit sur la colonne, par exemple le tampon d'élution, par quel moyen décroche-t-il l'ADN de la colonne, etc...

    Merci
    Cordialement, Jacquet C

  5. #4
    chamouulox

    Re : Kit Miniprep NucleoSpin Plasmid

    Page 6 du document.

    "QIAGEN plasmid purification protocols are based on a modified alkaline lysis procedure, followed by binding of plasmid DNA to QIAGEN resin under appropriate low-salt and pH conditions. RNA, proteins, dyes, and low-molecular–weight impurities are removed by a medium-salt wash. Plasmid DNA is eluted in a high-salt buffer and then concentrated and desalted by isopropanol precipitation."

    Cordialement,

  6. #5
    waaxx

    Re : Kit Miniprep NucleoSpin Plasmid

    Merci chamouulox, faudrait que j'apprenne à lire plus attentivement les manuels
    Cordialement, Jacquet C

  7. A voir en vidéo sur Futura
  8. #6
    TanguyE

    Re : Kit Miniprep NucleoSpin Plasmid

    Citation Envoyé par waaxx Voir le message
    Merci chamouulox, faudrait que j'apprenne à lire plus attentivement les manuels
    Ça peut aider

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