Microscope fond rouge?

[Ayel346]

Bonjour à tous,

Je m'excuse par avance de la stupidité de ma question, alors voilà je dois analyser un article scientifique (mon premier ). J'ai globalement compris mais il y a un petit détail que je trouve bizarre. Sur une figure, (image au microscope afin de comparer le nombre de cellules); le fond est rouge.
Je vois pas à quelle technique ça correspond, ni pourquoi ils ont fait ça. Je ne sais pas si je me suis bien exprimée donc je vous mets l'image en pièce jointe

Il s'agit des documents E et F.

La légende indique "(E, F) Microscopic findings after treatment of LNT-229 cells with vehicle (E) or 30 µM doxazosin (F) further illustrate doxazosin-associated cell death."

Merci d'avance à toute personne qui pourra m'aider
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[Taz_79]

Salut,

Pour moi l'image E et F sont des témoins, elles montrent que les cellules sont présentes et on en conclu que le marquage est bien spécifique. Les images ont été prises à la lumière blanche contrairement aux images A, B, C et D où les cellules ont été excitées à une certaine longueur d'onde. Les cellules ont certainement été immunomarquées par un anticorps couplée à un fluorochrome ou bien elles expriment une gène fluorescent (comme je n'ai pas l'article sous les yeux je ne peux pas préciser. Recherche dans le matériel et méthode où dans la légendes des autres images). Ensuite avec une lumière excitatrice on vient révéler le marquage des cellules (images A, B, C et D). Sans ces témoins, on pourrait se dire qu'il y a aucune cellule sur l'image A or c'est faux, ce qui montre bien la spécificité du marquage et des résultats obtenus.

Bonne soirée

[Flyingbike]

oui mais pourquoi en rouge ?

[Ayel346]

Merci beaucoup pour ta réponse Taz_79 ; donc si j'ai bien compris pour toi ça sert à montrer que l'image A comporte bien des cellules ? Effectivement je n'ai
pas mis le lien de l'article ( https://www.scienceopen.com/document...05be0a661d.pdf , libre d'accès).

Je résume rapidement : on veut démontrer qu'une molécule (appelée doxazosine) induit l'apoptose de cellules cancéreuses. Pour les images A-B-C-D c'est la
méthode TUNEL qui est utilisée, elle permet de marquer (avec fluorescence) les cellules apoptotiques (l'apoptose augmente avec la quantité de doxazosine).
Dans les schéma E-F , on voit au microscope les cellules avant et après l'ajout de cette molécule. On voit d'ailleurs qu'il y a moins de cellules après l'ajout
de doxazosine (image F). C'est donc uniquement l'image E qui est un témoin. Et effectivement je ne comprends toujours pas pourquoi le fond est rouge
(c'est aussi le cas pour la figure 3, pour 8 c'est orange ) . C'est peut être un détail insignifiant mais j'anticipe au cas où le prof me poserait la question.

[A voir en vidéo sur Futura]

[Ayel346]

Alors je pense peut être avoir compris. L'article précise que la viabilité cellulaire a été mesurée grâce à la méthode "XTT", qui repose sur ce principe : si la cellule est vivante, une enzyme mitochondirale (la succinate déshydrogénase) pourra réduire le tétrazolium en un composé orangé qui est le formazan. Ce composé étant soluble, ça expliquerait pourquoi la préparation devient rouge/orangée. Chose étrange, sur pas mal de site ils disent que le formazan est orangé mais qu'il absorbe à 450 nm ( normalement couleur bleue/violet). Bizarre tout ça Mais merci quand même de m'avoir répondu