shifting sur sds-page anticorps

[invitef5d7c377]

Bonjour.

J'ai un petit problême avec des gels SDS-Page ( criterion precast gel, stainfree, 26 puits) migration dans tampon de migration et slb4X utilisé comme loading buffer.

Je fait migrer des igG provenant de mes échantillons. Je veux les quantifier à l'aide d'une densitométrie (avec ImageLab)
J'utilise une courbe standard réalisée avec un standard d'igG commercial.

Je remarque que le standard migre à environ 155kDa et que mes échantillons eux migrent vers 130 kDa plutot.
Je me demandait si qqn a une explication pour ce shifting de mes bandes et de ce qui a pu causer le problême.

merci.
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[Yoyo]

salut

Je dis peut être une bêtise, mais ca me parait super haut comme poids moléculaire apparent pour des igG. Tu fais ta migration dans des conditions particulières?

Yoyo

[invitef5d7c377]

condition non reductrices, non denaturées et meme migree dans une cuve plongee dans un bac d eau froide pour eviter au maximum la degradation due a la chaleur.

[Yoyo]

salut

mais est ce reelement un probleme? si ca se trouve les igG standards provienents d'un autre organisme?

Yoyo

[A voir en vidéo sur Futura]