bjr a tous
voila j'ai un TP "virtuel" à faire dans lequel je dois décrir les manipulations pour introduire un gène en antisens d'Arabidopsis thaliana chez le pois.
Le problème est que je ne sais pas si je dois amplifier par PCR le gène ou l’ARN (quel est le mieux) et comment obtenir la copie antisens ?
Dois-je prendre des primers qui ont un site de restriction bien spécifique pour pouvoir mettre l’ADN amplifié dans le vecteur ti désarmé après ? Quel doit être la longueur du primer environ?
Le promoteur 35S faut-il que je le clone aussi dans le vecteur ou est il généralement déjà dans les plasmide ti désarmé avec un site polylinker ? Si quelqu'un connait un site ou il y a un schéma ce serait super.
Je sais que ça fait bcp de question, mais tous les sites que j’ai trouvé sur le net étais plutôt flou au niveau de ces étapes.
Merci d’avance !!!
Cléa