Immunoprécipitation de la chromatine

[invitef8c5451f]

Bonjour !
Dans le cours que j'étudie actuellement nous apprenons que la CHIP est une méthod e permettant de determiner le site de liaison de l'adn sur le génome si je ne me trompe pas.
Le protocole donné est : extraction de l'ADN depuis la cellule puis isolation de la chromatine que l'on souhaite- on retire les protéines fixées dessus puis on séquence l'adn ?
Je crois avoir mal prise mes notes de cours sur cette méthode car je ne comprends pas le lien entre le protocole et l'objectif de cette méthode... J'ai recherché sur internet haha mais pour le coup c'était au dela de mon niveau de compréhensions.
Si une âme charitable pourrait m'expliquer la CHIP avec son objectif elle me sauverait la vie
Merci beaucoup de votre aide
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[invite3a3d529a]

Coucou, dis donc tu as l'air de galérer dans tes cours toi

La ChIP permet d'identifier le site de fixation d'une protéine sur l'ADN. Il faut posséder l'anticorps spécifique de la protéine qui t'intéresse (ou alors exprimer une protéine taggée dans ta cellule et avoir un anticorps anti-tag). Donc tu extrais les complexes ADN/protéines des cellules, tu les découpes en courts fragments (qq centaines de paires de bases par exemple pour commencer) tu incubes avec ton anticorps. Tu isoles les complexes formés Ac/protéine/ADN. Séquençage de l'ADN = tu peux identifier le site de liaison de ta protéine dans le génome.

J'espère que le lien entre l'objectif et le protocole est clair =)

Dalmia

[invitef8c5451f]

Oh la la merci énormément Dalmia elle me parait tout de suite beaucoup plus clair