Bonjour tout le monde,
En étudiant la structure d'un plasmide servant a faire de la transgénèse via agrobacterium, j'ai rencontré un soucis avec la structure du gène de résistance. Le gène utilisé est le gène de résistance a la kanamycine, NPTII (pour néomycine phosphotransférase II). Dans la construction du plasmide il est précédé du promoteur du CaMV 35S. Cependant pour réaliser la selection des bactéries transformé puis des cellules végétales transformé, on a besoin de l'expression de NPTII à la fois dans les bactéries et les cellules eucaryotes.
Ma question est donc a-t'on pu laisser le promoteur procaryote initiale de NPTII, précédé du promoteur eucaryote 35S pour avoir une expression dans les deux situation, cela fonctionnerai t'il d'avoir deux promoteur qui se suivent ? Où a t'on simplement fait deux copies du gène NPTII, un avec son promoteur initiale l'autre avec le 35S ?
Merci d'avance si quelqu'un a une réponse a cette question
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