Bonjour,
Pour une préparation de TP, j'ai des calculs à préparer mais je ne vois pas comment faire.
Il s'agit d'une digestion d'ADN génomique par EcoRI.
La digestion par EcoRI se fait sur 10 ug d'ADN de hareng (c = 1566 ug/uL) dans un volume final de 50 uL
Sachant que la concentration de EcoRI est de 50 u/uL dans 50 % de glycérol. Le tampon dans lequel l'enzyme fonctionne est à une concentration mère de 10X.
Pour avoir une bonne coupure, la concentration en glycérol ne doit pas dépasser 5% et un excès de 10 fois en unité d'enzyme est recommandé par rapport à la quantité d'ADN en ug.
Je dois trouver le volume à préléver de :
- ADN : V = 10 / 1566 = 6 uL
- Enzyme EcoRI : je dois trouver 2 uL mais je ne vois pas comment faire. J'en déduis qu'il ne faut pas dépasser 100 ug
- tampon : 50 / 10 = 5 uL
- eau : 50 - (V ADN + V enzyme + V tampon)
Merci
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