Calcul du nombre de phages initial dans une solution

[Pinapple]

Bonjour,

J'aimerais calculer le nombre de phage présents dans mon échantillon initial mais je ne sais pas trop comment m'y prendre..

J'ai réalisé des dilutions en cascade (jusqu'à la dilution 10^-8) de ma suspension phagique à raison de 1/10 pour avoir un volume final de 1 mL. Ensuite, j'ai prélevé 0,2 mL de ma suspension diluée auxquels j'ai ajouté 0,2 mL de suspension bactérienne. Enfin, j'ai prélevé 0,2 mL de ce mélange que j'ai ajouté à un tube de top agar de 5 mL. J'ai obtenu sur la boite 10^-8 49 UFP, soit 49 phages.

Le problème c'est que je ne sais pas comment remonter à la suspension initiale pour en déduire le nombre de phage..

J'espère que vous pourrez m'aider.
Merci d'avance !
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[tRNA]

Bonjour Pinapple,

en général on détermine une concentration en phages pour l'échantillon initial, c'est ce que je vais faire ici. Ensuite tu n'auras plus qu'à multiplier cette concentration par le volume (que tu n'as pas mentionné) de ton échantillon initial pour déterminer le nombre de phage qu'il contenait.

Donc:
Tu as trouvé 49 phages pour 0.2mL de suspension étalée sur ta boite => cette suspension a une concentration en phage de 49 x 5 = 245 phages/mL.
Or cette suspension avait été diluée d'un facteur 2 ("j'ai prélevé 0,2 mL de ma suspension diluée (aka la dilution 10^-8) auxquels j'ai ajouté 0,2 mL de suspension bactérienne"), donc la concentration réelle de ta dilution 10^-8 était 245 x2 = 490 phages/mL.
ET donc, puisqu'il s'agissait d'une dilution 10^-8 de ton stock, ton stock est lui même à 490 x10⁸ soit 4.9x10¹⁰ phages/mL.