Bonsoir
J'ai besoin d'aide je dois répondre à cette question dans le cadre d'un TP de biologie moléculaire, je réponds partiellement à la question car si je comprends bien il faut réaliser une digestion simple et double sur un plasmide?
Donner l’intérêt de réaliser une digestion (simple et double) sur un plasmide ?
Il sera parfois nécessaire d’utiliser deux enzymes de restriction différents afin d’obtenir une coupe de chaque côté du gène d’intérêt désiré. L’utilisation de deux sites d’enzymes de restriction différents peut aider à assurer la bonne orientation du gène d’intérêt lors de son insertion et éviter que le vecteur plasmidique ne se lie à lui-même (le gène avance ou recule ou se referme)L’utilisation d’un enzyme de restriction avant le gène d’intérêt et d'un enzyme différent après aide à assurer la bonne orientation du fragment inséré en créant deux extrémités collantes uniques qui ne peuvent pas se refixer.
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