anthrone ac sulfurique et sucres totaux

[invitec3b4c604]

salut,
pour doser les sucres totaux, j'utilise la méthode d'anthrone, j’ai commencé par la préparation de la courbe étalon en utilisant le glucose mais j'ai un problème:
absence total de couleur bleu vert et apparition d'une masse de couleur blanche (un précipité qui flotte) et le reste du tube est jaune,
le protocole:
anthrone 0,2%
ac sulfurique 95%
d'après vous c 'est quoi la cause de l'apparition de ce précipité et pour quoi j'ai pas de couleur bleu vert???????????????
merci
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[dggchim]

Voici un protocole, suis tu le même protocole ?

2.3.Dosage des glucides solubles :

2.3.1.Réactifs :

- Solution d'anthrone : solution à 0,2 % dans de l'acide sulfurique concentré (réactif à manipuler avec précaution)
- Solution mère de glucose : 5 mM à dissoudre dans l'eau distillée

2.3.2.Courbe d'étalonnage :

A partir de la solution mère, diluée 20 fois, établir les concentrations
0 - 50 -100 - 250 et 500 nmoles/2 ml.

Dans un tube à essai, mettre :
- 2 ml de solution de glucose
- 4 ml d'anthrone, agiter, boucher les tubes
- Placer les tubes 7min30 au bain-marie bouillant
(respecter impérativement ce temps de réaction)
- Refroidir dans de l'eau glacée
- Lecture de l'absorbance à 630 nm

http://www.univ-orleans.fr/sciences/...s_salinite.htm

[invite11e994cb]

j'ai le même problème (apparition d'un précipité qui flotte)! Est ce que vous avez réussi à trouver la cause?
Merci