Interrogation colonne HPLC

[invite89f8f214]

Bonjour à tous

Dans le cadre de mon boulot, j'utilise une chaîne HPLC Ultima 3000 de chez dionex (que je regrette fortement...)
Au moment de mon étalonnage, j'ai changé les colonnes et la problème :les nouvelles colonnes ne répondent pas du tout de la même manière que les anciennes (mauvaise séparation et pic qui sortent en 4 min au lieu de 15 ).
Je cherche donc quelqu’un de caler en HPLC qui pourrait m'expliquer comment 2 colonnes de marques différentes (teknokroma et supelco) mais avec les même propriétés peuvent réagir si différemment.
Ce sont des colonnes 25*4.6 mm LC NH2 5 µm (référence obligatoire pour la norme utilisée).
Je suis en solvant isocratique polaire (heptane).

Merci pour vos lumières, la je sèche.

Ludivine
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[moco]

Comment peux-tu dire que tes deux colonnes ont les mêmes propriétés, puisque l'expérience te prouve le contraire ?
Quelles sont les longueurs de tes colonnes ? Combien ont-elles de plateaux ?
Pourquoi dis-tu que le solvant heptane est polaire ? Rien n'est plus absurde ! L'heptane n'est pas polaire.

[invite89f8f214]

Bonjour

oups erreur de frappe je voulais bien sur écrire apolaire.
La longueur de mes colonnes est indiqué dans mon précèdent post 25 cm mais j'ai oublié l'unité reoups
Et pour ce qui des propriétés différentes c'est justement pour ca que je fais appel à vous je ne comprends pas comment 2 colonnes identiques sur le papier peuvent se comporter si différemment à l'usage
Avez vous une idée?

Merci

[moco]

Personne ne peut te répondre. Tu es le seul qui peut chercher une explication à ton étrange problème. La seule chose qui est claire est que tes colonnes ne sont pas identiques. Si le temps de rétention d'une substance est de 4 minutes dans l'une et de 15 minutes dans l'autre, c'est un indice clair que les colonnes sont différentes. A part toi, il n'y a que le fabricant qui peut te fournir une explication. Mais avant de lui écrire, il te faut déterminer le nombre de plateaux de tes deux colonnes, d'après la forme du pic, et comparer ces valeurs numériques. Je suis prêt à parier que le nombre de plateaux devrait être très différent de l'un à l'autre.

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