Nombre de passage Caco-2

[invite88a7d45c]

Est-ce que quelqu'un pourrait me renseigner :
quel doit être le nombre de passage des cellules Caco-2 en culture pour des tests d'uptake (lycopène) ?
SVP donnez moi vos références !!

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[invite2a651650]

bonjour,
je ne suis pas sur de comprendre la question...
vous voulez connaitre le nombre maximum de passages que l'on peut faire avec cette lignée ou bien vous voulez savoir comment réaliser le passage (trypsination) des cellules caco pour pouvoir faire votre test dans de bonnes conditions.
en règle générale, pour les lignées cellulaires, il ne faut jamais faire plus de 30-40 passages successifs sous peine de s'exposer à une dérive du modèle (dédifférenciation ou changement phénotypique).

[invite88a7d45c]

Ma question est :
entre quels nombres de passage faut il etre pour que les Caco-2 soient compétentes (enzyme, transporteur,...) pour des expériences d'absorption des caroténoïdes et plus précisement de lycopène.

[invite2a651650]

bonjour,

après un petit tour sur Pubmed, la majorité des auteurs ne le disent pas. sauf un papier, où ils utilisent leur Caco-2 entre les passages 18 et 70 (Reboul E et al. Biochem J. 2005 Apr 15;387(Pt 2):455-61. ).

pour aboutir a un épithélial intestinal différencié, ce qui est primoridal, est la facon dont sont cultivées les caco-2 : utilisation d'acide aminés non essentiels, FCS à 20%, ensemencement et cultures pendant 2 à 3 semaines.

n'importe quelle lignée cellulaire ne doit pas subir de trop grand nombres de passages. a chaque fois que l'on effectue un passage, on s'expose a une dérive de la lignée.

[A voir en vidéo sur Futura]