Bonjour à tous,
ma question parait simple : quelle est la différence entre une fusion transcriptionnelle et une fusion traductionnelle ? je ne suis pas certain de la réponse.
Sinon, avez vous le protocole expérimental pour réaliser ces fusions ?
merci d'avance...
Pour faire un peu avancer le problème :
la fusion traductionnelle est une fusion de gênes effectuée dans leur partie codante et respectant les cadres de lectures. Permet d'obtenir une protéine chimère. cette technique permet par exemple de faire une fusion entre un gène d'intérêt ( qui code pour une protéine d'intérêt ) et le gène qui code pour la GFP : c'est utiliser pour une localisation cellulaire de notre protéine d'intéret...
Mais pour la fusion transcriptionnelle, il s'agit de fusionner de fusionner des gènes intervenant dans la région transcrite mais non traduite... ( quelles sont ces régions...?)
application : l'étude de la régulation transcriptionnelle d'un promoteur...par exemple. Y a t-il quelqu'un dans la salle qui peut m'aider à mieux comprendre cette application ?
merci d'avance
comme on doit surment se connaitre on doit surement avoir suivi les meme cours. suis pas encore là dessus mais dès que j'y suis ce qui va arirver assez vite j'essaierai de t'expliquer... (demain sans doute...)
Envoyé par gobronn
bonsoir,
la fusion traductionnelle est une fusion de protéines conduisant à la synthèse d'une protéine hydride,
alors que la fusion transcriptionnelle est une fusion de gènes conduisant à la synthèse de 2 protéines séparées.
chaque stratégie a ses avantages et ses inconvénients,
par exemple il arrive qu'une fusion traductionnelle ne parvienne pas à se folder correctement,
auquel cas la protéine hybride perd les activités biologiques des 2 protéines de départ.
en pratique une fusion traductionnelle chez K12 est constituée d'un ensemble promoteur + RBS + gene1 (sans stop) + gene2 complet fusionné en phase (option: linker),
alors qu'une fusion transcriptionnelle est constituée d'un ensemble promoteur + RBS1 + gene1 (complet) + RBS2 + gène2 (complet),
en fait chez K12 ça s'appelle un opéron et ça existe naturellement.
les 2 types de fusions peuvent se réaliser par PCR ou par clonage classique avec enzymes de restriction,
question de goût et de taille des génes 1 et 2.
Hiro
bonjour et bonne année à tous...
à propos d'une fusion traductionnelle, j'imagine qu'on peut l'utiliser pour isoler une protéine d'intérêt ou bien réaliser une fusion entre une protéine d'intérêt et la GFP ( pour visualiser et localiser le chemin emprunté par la protéine dans la cellule ) je me trompe ?
sinon à quoi correspondent les loci RBS ( ribose binding sequence ?? )
merci pour ces infos, je commence à mieux comprendre
nico
RBS = Ribosome Binding Site, indispensable à l'initiation de la traduction
= Séquence Shine-Dalgarno chez les Procaryotes
= Séquence Kozak chez les Eucaryotes
ok c'est bien ce que je pensais mais j'avais jamais vu ce terme global de RBS ...merci beaucoup
