RNA Later et coupe pour microscopie

[invite77814c69]

bonjour,

je ne sais pas si vous aurez une réponse à me fournir: j'aimerais savoir si quelqu'un a déjà réalisé des coupes en cryostat de tissus tumoraux (ou autres) conservés dans le RNALater (Qiagen). Chez nous on a vraiment du mal, car le RNALater forme autour du tissu une pellicule aqueuse qui n'est pas compatible avec le milieu d'inclusion du cryostat (contient du glycol) et ça fait des trous sur la coupe. On a bien essayé de laver à l'Ethanol pour déshydrader mais sans succés. On a même tenté de laver 2 fois le tissus dans des bains de PBS-RNase free, mais ça dégrade les structures histologique du tissus pour l'observation c'est embétant. ..pas de solution donc?!

merci de votre aide

karine
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[inviteba44b9ab]

Bonjour

je n'ai pas de reponse precise a ta question mais perso, le RNAlater, je ne fais pas trop confiance. Ca a plusieurs inconvenients (ici avec tes coupes au cryostat) et j'ai moi observe des degradations des ARN.
Peut etre as tu un autre moyen a disposotion pour conserver tes echantillons' Un milieu aqueux RNA-free... je ne sais pas trop
desolee
good luck