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Plasmides et Mycoplames



  1. #1
    Idrix

    Plasmides et Mycoplames


    ------

    Bonjour,
    Je travaille sur une lignée cellulaire transfectée avec un gène rapporteur. Il ne s'agit pas d'un clône, mais d'un pool. Cette lignée m'a été transmise dans le cadre d'une collaboration. Je me suis rendue compte que cette lignée était mycoplasmée, et je l'ai donc envoyée en décontamination dans une société spécialisée. Ils m'ont renvoyé des cryo parfaitement sains.
    Le hic, c'est que maintenant, l'expression de mon gène rapporteur est complètement irrégulière, alors que j'avias une très bonne reproductibilité. J'ai aussi perdu environ 90% de mon expression (mais ça c'est pas grave: le peu qui reste est tout à fait suffisant).
    Ma question est la suivante: est-ce que les mycoplames auraient pu intégrer le plasmide et de ce fait masquer une hétérogénéité lié au fait qu'il s'agisse d'un pool cellulaire? Je précise que la pression de sélection est maintenue en permanence.
    Si quelqu'un a une idée là-dessus...
    Merci d'avance

    -----

  2. #2
    Yoyo

    Re : Plasmides et Mycoplames

    salut

    j'aurai plutot tendance a penser que le probleme reside dans la technique de decontamination et que c'est elle qui a affectée l'expression de ton gene rapporteur (et sans doute d'autres genes)

    Yoyo

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