Bonjour,
Je cultive des cellules HEK-293 dans un milieu commercialement accessible, le DMEM avec 4,5g/L glucose, 4mM Glutamine, sans pyruvate.
Certains d'entre vous sauraient ils si l'utilisation d'un tel milieu est contre indiquée pour l'étude de l'expression des récepteurs NMDA du glutamate ?
Autrement, quels autres milieux utilisez vous qui donnent des résultats satisfaisants ?
Merci
Guillaume / AAKN
Salut!
Pour ce qui estd es récepteurs je ne sais pas mais pour les HEK j'utilise du DMEM classique supplémenté en glutamine (classique) et en SVF, c'est tout et ça pousse bien!
A+
Vinc
Primum non nocere.
Je te conseille d'utiliser de l'APV à forte concentration renouvellé tous les jours à partir de l'expression des NMDAR. Car les NMDAR vont êre activés par le glutamate et provoquer une entrée de calcium qui déclenche l'apoptose.
Eventuellement utiliser un milieu sans glutamine auquel tu en rajoutes à plus faible concentration.
Jean-Luc
La violence est le dernier refuge de l'incompétence.
Salvor Hardin
Hello,
Merci à tous les deux pour vos réponses
@ Vinc : quel type de DMEM ? Quelle concentration en glucose ? Quel type de glutamine (classique, ou glutamax ?) ?
@ Jean-Luc : Il y a de l'APV dans mon milieu, à hauteur de 500 mM. Penses tu celà suffisant ? Est il vraiment nécessaire de renouveller l'APV tous les jours (48h, ca irait ?) dans mes conditions ? Que penses tu d'ajouter également du Magnésium (1-2mM) ?
merci pour votre aide
Guillaume / AAKN
oui la concentration devarit être suffisante.Envoyé par AAKN
24h ou 48 h, à toi de voir, il faut suivre l'état des cellules...
TRès bonne idée le magnésium, jenne sais plus s'il y en a dans le DMEM par contre, je suppose que oui...
Jean-Luc
La violence est le dernier refuge de l'incompétence.
Salvor Hardin
