Error-prone PCR

invite153e7487 · 01/06/2007, 14h17

Bonjour à tous,

Je cherche à faire de la mutagenèse aléatoire par PCR (du genre error-prone PCR) sur une séquence donnée. Avez-vous des protocoles éprouvés qui marchent bien pour vous ?

Merci beaucoup !

T.

**Yoyo** · 01/06/2007, 16h40

salut

oui tu remplaces le Mg2+ par du Mn2+ et ca va faire pleins d'erreur

sinon tu diminues la quantité de G/C et tu augmente les nucleotides A/T et tu vas forcer la taq a faire des erreurs.

Yoyo

**pimd** · 05/06/2007, 09h39

En augmentant la concentration en Mg++ aussi

**jmbowie** · 05/06/2007, 11h37

Ou alors tu gardes ton enzymes à température ambiante pendant un jour ou deux.
(Stagiaire attitude)

A voir en vidéo sur Futura · Aujourd'hui

invite153e7487 · 07/06/2007, 21h51

Merci à tous, je vais essayer

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