Je cherche à faire de la mutagenèse aléatoire par PCR (du genre error-prone PCR) sur une séquence donnée. Avez-vous des protocoles éprouvés qui marchent bien pour vous ?
Merci beaucoup !
T.
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01/06/2007, 17h40
#2
invitec9f0f895
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Re : Error-prone PCR
salut
oui tu remplaces le Mg2+ par du Mn2+ et ca va faire pleins d'erreur
sinon tu diminues la quantité de G/C et tu augmente les nucleotides A/T et tu vas forcer la taq a faire des erreurs.
Yoyo
05/06/2007, 10h39
#3
invite86aad8f6
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Re : Error-prone PCR
En augmentant la concentration en Mg++ aussi
05/06/2007, 12h37
#4
invitee863e61a
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Re : Error-prone PCR
Ou alors tu gardes ton enzymes à température ambiante pendant un jour ou deux.
(Stagiaire attitude)